高壓細胞破碎機破碎不同生物細胞的破碎方法
發布時間:2021-11-09 點擊次數:291次
高壓細胞破碎機破碎不同生物細胞的破碎方法
高壓細胞破碎機的應用范圍非常廣泛,是加速和分離液體、細胞的理想設備,在許多實驗室都有很重要的作用,因此得到了很多實驗者的喜愛和認可。
高壓細胞破碎機將研磨珠放入樣品容器中,利用容器的高速旋轉和振動,帶動研磨珠劇烈運動,研磨粉碎樣品,從而打破細胞壁或將固體顆粒處理成粉末。當細胞分裂凈化蛋白質時,蛋白質首先從組織或細胞中釋放出來,并保持其原始的自然狀態,而不會失去其活性。因此,使用適當的方法來分解組織和細胞。
不同生物體或不同部位的同一生物組織,其細胞碎片很難變化,使用不同的方法,如動物器官細胞膜比較脆弱,容易斷裂,植物和微生物由于具有較強的纖維素、血糖細胞壁。幾乎所有細菌的細胞壁都由肽多糖組成,多糖鏈不溶性多糖鏈由短肽相互連接,周圍有網狀結構,使它們具有一定的形狀和強度。破碎細菌的主要耐性來自肽多糖的網狀結構,其程度和強度取決于多糖鏈上存在的肽鍵數量及其相互關聯的程度。
有哪些手段可以實現細胞的破碎,小編帶你了解幾種常見的細胞破碎方法。
一、機械方法
1.搗碎發:一般用組織搗碎機,適用于動物組織及植物組織的破碎。
2.研磨法:一般手工研磨,適用少量的細菌或堅硬之物組織。
3.勻漿法:主要是利用高壓827bar使細胞破碎。
二、物理方法
1.溫差法:主要通過反復的凍溶或急熱驟冷等溫度變化來達到目的。
2.壓差法:使用加壓的方法主要采用細胞破碎機來破碎。
3.超聲法:采用超聲波15-20KHz使細胞在高強度急劇振動下破碎。
三、生物化學方法
1.采用化學試劑甲苯.丙酮.氯仿.Triton等通過化學滲透使細胞內含物選擇性的滲透出來。
2.自溶法:主要通過一定的pH和溫度,借助細胞內的自身酶系使細胞破碎。
3.酶解法:利用各種水解酶或變性劑如8M尿素、6M鹽酸胍等變性劑、表面活性劑NLS、SDS等使細胞破碎。